|
+
-
๋ถ๋งํฌ ์ ์ฅ
ํนํ1์ฌ์ฌ๊ฑด
ํนํ๋ฒ์ 2001. 6. 22. ์ ๊ณ 99ํ8653 ํ๊ฒฐ๏ผ์๊ณ
[๊ฑฐ์ ์ฌ์ (ํน)][ํ์ง2001-1,770]
ใํ์์ฌํญใ
[1]๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ ๊ธฐํํ์ง ์๋ํ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์์ ์ถ์์ธ์ด ์ฆ๋ช
ํ๋ ๊ฒ ์ด์ธ์ ๊ทธ ์
์๋ฐฉ๋ฒ๊ณผ ์
์์ฅ์ ๋ฑ์ ์ถ์๋ช
์ธ์์ ๋ฐ๋์ ๊ธฐ์ฌํ์ฌ์ผ ํ๋์ง ์ฌ๋ถ(์๊ทน) ๋ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ด์ฉํ ๋ฐ๋ช
์ ์์ด์ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ์ด ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ฌํํ ์ ์๋๋ก ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๋ ๊ฒฝ์ฐ, ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ ๊ธฐํ ์๋ถ(์๊ทน)
[2]๊ธฐํํ์ง ์๋ํ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์์ด ์ฆ๋ช
๋์ง ์์๋ค๋ ์ด์ ๋ก ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์๋ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ค์ํ ์ ์์ ์ ๋๋ก ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ง ์๋ค๊ณ ๋ณธ ์ฌ๋ก
ใํ๊ฒฐ์์งใ
[1] ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น(1987. 7. 1. ๋ํต๋ น๋ น ์ 12199ํธ๋ก ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 1์กฐ ์ 2ํญ์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ด์ฉํ ๋ฐ๋ช
์ ๋ํ์ฌ ํนํ์ถ์์ ํ๊ณ ์ ํ๋ ์๋ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ธฐ๊ด์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ธฐํํ๊ณ , ๊ทธ ๊ธฐํ์ฌ์ค์ ์ฆ๋ช
ํ๋ ์๋ฉด์ ์ถ์์์ ์ฒจ๋ถํ์ฌ์ผ ํ๋ค.๊ณ ๊ท์ ํ๋ฉด์, ๊ทธ ์ 3ํญ์ ์ 2ํญ์ ๊ฒฝ์ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ด ์ํ๋ ๊ธฐ์ ๋ถ์ผ์์ ํต์์ ์ง์์ ๊ฐ์ง ์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๋์๋ ์ด๋ฅผ ๊ธฐํํ์ง ์๋ํ ์ ์๋ค.๊ณ ๊ท์ ํ๊ณ ์๋๋ฐ, ์ด๋ ๊ทน๋ฏธ์ ์ธ๊ณ์ ์กด์ฌํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ฑ์ง์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ํ์ค์ ์กด์ฌ๊ฐ ํ์ธ๋๊ณ ์ด๋ฅผ ์ฌ์ฐจ ์
์ํ ์ ์๋ ๋ณด์ฅ์ด ์๋ ํ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ค์ํ ์ ์๋ ๊ฒฝ์ฐ์ ํด๋น๋์ด ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ ์ฐ์
์ ์ด์ฉํ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ ์ ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ ๊ท์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ถ์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋ฅผ ๋ณด์ํ๋ ๋ป์์ ์ด๋ฅผ ์ถ์์์ ๊ธฐํํ๊ฒ ํ๊ณ , ๋ค๋ง ๊ทธ ์กด์ฌ๊ฐ ํ์ธ๋๊ณ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ธฐํํ ํ์๊ฐ ์๊ฒ ํ ์ทจ์ง๋ผ๊ณ ํ ๊ฒ์ด๊ณ , ์ฌ๊ธฐ์ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด๋ผ ํจ์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ๊ณต์ง๊ณต์ฉ๋์ด ์ํ๋๊ณ ์๊ฑฐ๋ ์ ์ฉํ ์ ์๋ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๋ณด์กด๋์ด ์๋ ํํธ ์์ ๋ก์ด ๋ถ์๋๋ ๊ฒ ๋ฑ์ ๋งํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก์, ์ด์ ๊ฐ์ด ๊ธฐํ์ด ๋ฉด์ ๋๋ ์๊ฑด์ ์ถ์์ธ์ด ์ด๋ฅผ ์ฆ๋ช
ํจ์ผ๋ก์จ ์ถฉ๋ถํ๊ณ ๋ฐ๋์ ๊ทธ ์ถ์ ๋ช
์ธ์์ ์
์๋ฐฉ๋ฒ๊ณผ ์
์์ฅ์ ๋ฑ์ ๊ธฐ์ฌํ์ฌ์ผ๋ง ๊ตฌ ํนํ๋ฒ(1990. 1. 13. ๋ฒ๋ฅ ์ 4207ํธ๋ก ์ ๋ฌธ ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 8์กฐ ์ 3ํญ์ ํด๋นํ๋ค๊ณ ํ ๊ฒ์ ์๋๋ฉฐ, ๋ํ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ํ์กดํ๋ ์ด์ ๋ฐ๋์ ๊ตญ๋ด์ ํ์กดํ๋ ๊ฒ์ด์ด์ผ ํ ํ์๋ ์๊ณ ๊ตญ์ธ์ ํ์กดํ๋ ๊ฒ์ด๋ผ ํ๋๋ผ๋ ๊ตญ๋ด์ ๋น์
์๊ฐ ์ด๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ค๊ณ ์ธ์ ๋ ๋์๋ ์ด๋ฅผ ๊ธฐํํ์ง ์๋ํ ์ ์๋ค๊ณ ๋ณด์์ผ ํ๊ณ , ๋์๊ฐ ๋ฐ๋ช
์์ ์ด์ฉํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ์๋๋ผ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์์ฑ๋ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ํด๋นํ๋ ๊ฒ์ด๋ผ ํ๋๋ผ๋ ์ด๋ฅผ ์์ฑํ๋ ๊ณผ์ ์ ํ์ํ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , ๋ ๊ทธ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ๊ณผ ๊ณต์ง์ ๊ท ์ฃผ ๋ฑ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ฌํํ ์ ์๋๋ก ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๋ค๋ฉด, ๊ฒฐ๊ตญ ๋น์
์๊ฐ ์ด๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ ๋ณผ ๊ฒ์ด์ด์ ์ด๋ฌํ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ๋ ์ ์ํ๋ น ์ 1์กฐ ์ 3ํญ ๊ท์ ์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ฒ์์ ํฌํจ๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ ์ด๋ฅผ ๊ธฐํํ์ง ์๋ํ ์ ์๋ค.
[2]๊ธฐํํ์ง ์๋ํ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์์ด ์ฆ๋ช
๋์ง ์์๋ค๋ ์ด์ ๋ก ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์๋ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ค์ํ ์ ์์ ์ ๋๋ก ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ง ์๋ค๊ณ ๋ณธ ์ฌ๋ก.
ใ์ฐธ์กฐ์กฐ๋ฌธใ
[1] ๊ตฌ ํนํ๋ฒ(1990. 1. 13. ๋ฒ๋ฅ ์ 4207ํธ๋ก ์ ๋ฌธ ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 6์กฐ ์ 1ํญ( ํํ ์ 29์กฐ ์ 1ํญ ์ฐธ์กฐ), ์ 8์กฐ ์ 3ํญ( ํํ ์ 42์กฐ ์ 3ํญ ์ฐธ์กฐ), ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น(1987. 7. 1. ๋ํต๋ น๋ น ์ 12199ํธ๋ก ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 1์กฐ ์ 2ํญ, ์ 3ํญ( ํํ ์ 2์กฐ ์ 1ํญ ์ฐธ์กฐ)/ [2] ๊ตฌ ํนํ๋ฒ(1990. 1. 13. ๋ฒ๋ฅ ์ 4207ํธ๋ก ์ ๋ฌธ ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 6์กฐ ์ 1ํญ( ํํ ์ 29์กฐ ์ 1ํญ ์ฐธ์กฐ), ์ 8์กฐ ์ 3ํญ( ํํ ์ 42์กฐ ์ 3ํญ ์ฐธ์กฐ), ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น(1987. 7. 1. ๋ํต๋ น๋ น ์ 12199ํธ๋ก ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 1์กฐ ์ 2ํญ, ์ 3ํญ( ํํ ์ 2์กฐ ์ 1ํญ ์ฐธ์กฐ)
ใ์ฐธ์กฐํ๋กใ
[1] ๋๋ฒ์ 1991. 8. 27. ์ ๊ณ 90ํ1512 ํ๊ฒฐ(๊ณต1991, 2439), ๋๋ฒ์ 1992. 3. 31. ์ ๊ณ 90ํ1260 ํ๊ฒฐ(๊ณต1992, 1427), ๋๋ฒ์ 1997. 3. 25. ์ ๊ณ 96ํ658 ํ๊ฒฐ(๊ณต1997์, 1235)
ใ์ ๋ฌธใ
ใ์๊ณ ใ ๋ณด๋ ์ค๋ธ ๋ฆฌ์ ์ธ ์ค๋ธ ๋ ์ ๋๋ฒ์ํฐ ์ค๋ธ ์์ฑํด (์์ก๋๋ฆฌ์ธ ๋ณ๋ฆฌ์ฌ ๊น์งํ)
ใํผ๊ณ ใ ํนํ์ฒญ์ฅ
ใ์ฃผ๋ฌธใ
1. ์๊ณ ์ ์ฒญ๊ตฌ๋ฅผ ๊ธฐ๊ฐํ๋ค.
2. ์์ก๋น์ฉ์ ์๊ณ ์ ๋ถ๋ด์ผ๋ก ํ๋ค.
ใ์ฒญ๊ตฌ์ทจ์งใ ํนํ์ฌํ์์ด 1999. 9. 30. 98์2550ํธ ์ฌ๊ฑด์ ๋ํ์ฌ ํ ์ฌ๊ฒฐ์ ์ทจ์ํ๋ค.
ใ์ด์ ใ
1. ๊ธฐ์ด ์ฌ์ค
{์ธ์ ๊ทผ๊ฑฐ๏ผ๋คํผ ์๋ ์ฌ์ค}
๊ฐ. ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์์ง
์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
{์ถ์๋ฒํธ ์ 87-6561ํธ/1987. 6. 27. ์ถ์(1986. 6. 27. ๋ฏธ๊ตญ์์ ์ถ์๋ฒํธ ์ 879,423ํธ๋ก ํนํ์ถ์ํ ๊ฒ์ ์ฐ์ ๊ถ ์ฃผ์ฅํ์ฌ ์ฐ๋ฆฌ ๋๋ผ์ ์ถ์ํจ)}์ ์ ํ๊ตฌ ํ์ฑ๊ณผ์ ์ ์กฐ์ ํ๋๋ฐ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ ํธ๋ฅด๋ชฌ์ธ ์๋ฆฌํธ๋กํฌ์ด์ํด์ ์ ์ ๊ณตํ์ ์ผ๋ก ์์ฐํ๋ ๊ธฐ์ ์ ๊ดํ ๊ฒ์ผ๋ก, ๊ทธ ํนํ์ฒญ๊ตฌ๋ฒ์๋ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ๋ค.
1. ์ฌ๋์ ์๋ฆฌํธ๋กํฌ์ด์ํด ์ ์ ์์ Apaโ
์ ํ๋จํธ์ ํจ์ ํ๋ ์ 1๋์ ๋ํ๋ ๋ดํด๋ ์คํฐ๋ ์์ด์ ํ๋ผ์ค๋ฏธ๋์ ์ฝ์
ํ์ฌ ๋ฒกํฐ๋ฅผ ์ป๋ ๋จ๊ณ, ๊ทธ ๋ฒกํฐ๋ก ํฌ์ ๋๋ฌผ ์์ฃผ ์ธํฌ์ฃผ๋ฅผ ํ์ง๊ฐ์ผ์ํค๋ ๋จ๊ณ, ์ด ํ์ง๊ฐ์ผ๋ ์ธํฌ์ฃผ๋ฅผ ๋ฐฐ์ง์ ์ ์ด์์ผ ์ธํฌ์ฃผ๊ฐ ์๋ฆฌํธ๋กํฌ์ด์ํด์ ๋ฐํํ ์ ์๋๋ก ํ๋ ๋จ๊ณ ๋ฐ ํ์ง๋ฐํ๋ ์๋ฆฌํธ๋กํฌ์ด์ํด์ ํ์ํ๋ ๋จ๊ณ๋ฅผ ํฌํจํ๋, ์๋ฌผํ์ ํ์ฑ์ ์ง๋ ์ฌ๋์ ์ ์กฐํฉ ์๋ฆฌํธ๋กํฌ์ด์ํด๋ฅผ ํ์ง๋ฐํ์ํค๋ ๋ฐฉ๋ฒ.
2.์ 1ํญ์ ์์ด์, ์๊ธฐ ํ๋ผ์ค๋ฏธ๋๋ pD11 ๋๋ pBD์ธ ๊ฒ์ ํน์ง์ผ๋ก ํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ.
3.์ 1ํญ์ ์์ด์, ์๊ธฐ ํฌ์ ๋๋ฌผ ์์ฃผ ์ธํฌ์ฃผ๊ฐ COS-7 ์ธํฌ ๋๋ BHK ์ธํฌ์ธ ๊ฒ์ ํน์ง์ผ๋ก ํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ.
4.์ 1ํญ์ ์์ด์, ์๊ธฐ ์ธํฌ์ฃผ๋ ๋ฐฐ์๋ฐฐ์ง 1โ๋น 200๋ง ์ ๋ํธ(Unit) ์ด์์ ์๋ฆฌํธ๋กํฌ์ด์ํด ๋ช
๋ชฉ ์์จ์ ์ ๊ณตํ ์ ์๋ ๊ฒ์ ํน์ง์ผ๋ก ํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ.
๋. ์ด ์ฌ๊ฑด ์ฌ๊ฒฐ ์ด์ ์ ์์ง
ํนํ์ฌํ์์ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ์ ์ด์ ๋ก, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ฐ๋ณต์ฌํ์ ์ํ์ฌ ๊ผญ ํ์ํ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ธฐํํ์ง ์์๊ณ , ๊ทธ ์ฉ์ด์
์์ฑ๋ ์
์ฆ๋์ง ์๋ํ์ฌ, ๋นํด ๊ธฐ์ ๋ถ์ผ์์ ํต์์ ์ง์์ ๊ฐ์ง ์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ค์ํ ์ ์์ ์ ๋๋ก ๋ช
์ธ์๊ฐ ๊ธฐ์ฌ๋์ง ์์๋ค๋ ์ด์ ๋ก ๊ตฌ ํนํ๋ฒ(1990. 1. 13. ๋ฒ๋ฅ ์ 4207ํธ๋ก ์ ๋ฌธ ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ, ์ดํ ๊ฐ๋ค) ์ 6์กฐ ์ 1ํญ ๋ณธ๋ฌธ, ์ 8์กฐ ์ 3ํญ ๋ฐ ๊ฐ์๋ฒ์ํ๋ น ์ 1์กฐ ์ 2ํญ์ ๊ท์ ์ ์ํ์ฌ ๊ทธ ๋ฑ๋ก์ ๊ฑฐ์ ํ ์์ฌ์ ์ ์ ๋นํ๋ค๊ณ ํ์ฌ, ์๊ณ ์ ๊ฑฐ์ ์ฌ์ ๋ถ๋ณต์ฌํ์ฒญ๊ตฌ๋ฅผ ๊ธฐ๊ฐํ๋ ๋ด์ฉ์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ฌ๊ฒฐ์ ํ์๋ค.
{์ฌ๊ฒฐ ์ด์ ์ ์์ง๏ผโ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น(1987. 7. 1. ๋ํต๋ น๋ น ์ 12199ํธ๋ก ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ, ์ดํ ๊ฐ๋ค) ์ 1์กฐ ์ 2ํญ์ด ๊ท์ ํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ ๊ธฐํ์๊ฑด์ ๊ฐ์ถ์ง ๋ชปํ์๋ค.
โก์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ EPO๋ฅผ ์์ฐํ๋๋ฐ ์ฌ์ฉํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ธ๊ฐ ๊ฒ๋๋ผ์ด๋ธ๋ฌ๋ฆฌ์ Apa I ๋จํธ, ๋ฒกํฐ pD11, pBD, ์์ฃผ์ธํฌ์ธ COS-7๊ณผ BHK์ธ๋ฐ, ๊ทธ ์ค ์ธ๊ฐ ๊ฒ๋๋ผ์ด๋ธ๋ฌ๋ฆฌ์ Apa I ๋จํธ์ ๋ฐ๋ช
์ ์์ธํ ์ค๋ช
์ ์ค์๋ก 1๊ณผ ์ค์๋ก 2์ ๊ทธ ์ ์กฐ๋ฐฉ๋ฒ์ด ๋นํด ๊ธฐ์ ๋ถ์ผ์์ ํต์์ ์ง์์ ๊ฐ์ง ์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ค์ํ ์ ์์ ์ ๋๋ก ์์ธํ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ผ๋ฏ๋ก, ์ด๋ฌํ ๊ธฐ์ฌ์ ์ํ์ฌ ์ธ๊ฐ ๊ฒ๋๋ผ์ด๋ธ๋ฌ๋ฆฌ์ Apa I ๋จํธ์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ธ์ ๋๋ค.
โข๊ทธ๋ฌ๋ ์์ฃผ์ธํฌ๋ก ์ฌ์ฉํ COS-7 ๋ฐ BHK๋ ๊ตญ์ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด(ATCC)์ ๊ธฐํ๋ ๊ท ์ฃผ์ด๊ธฐ๋ ํ๋, ์ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ถ์ ๋น์ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ด ์๋๋ฏ๋ก COS-7 ์ธํฌ์ ๋ํ์ฌ๋ ๊ทธ ์ฉ์ด ์
์๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌํ์ฌ์ผ๋ง ๊ทธ ๊ธฐํ์ด ์๊ตฌ๋์ง ์๋๋ค๊ณ ํ ๊ฒ์ธ๋ฐ, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์๋ ์ด์ ๋ํ ๊ธฐ์ฌ๊ฐ ์๋ค.
โฃ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ํ์ง์ ํ์ฒด๋ฅผ ์ ์กฐํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ ๋ฒกํฐ pD11 ๋ฐ pBD๋ ๊ทธ ์
์๋ฐฉ๋ฒ์ด๋ ์์ ๋ฐฉ๋ฒ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ง ์๋ํ๋ค.
โค๋ํ, EPO๋ฅผ ๋ฐํ์ํฌ ์ ์๋ ์ต์ข
์ฌ์กฐํฉ ๋ฐํ๋ฒกํฐ์ธ pD11-EP, pBD- EP ์์ฒด๋ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์๋ํ๋ค.
โฅ๋ฐ๋ผ์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์๋ฆฌํธ๋กํฌ์ด์ํด(Erythropoietin๏ผ์ดํ 'EPO'๋ผ ํ๋ค)์ ํ์ง๋ฐํ์ํค๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ฌํํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋ฐ๋์ ์ด์ฉํ์ฌ์ผ ํ๋ ๋ฒกํฐ์ ์์ฃผ์ธํฌ๊ฐ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์๋ํ๊ณ , ๊ทธ์ ๋ํ ์ฉ์ด์
์์ฑ๋ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋์ง ์๋ํ๋ฉฐ, ์ต์ข
์ฌ์กฐํฉ ๋ฐํ๋ฒกํฐ ๋๋ ์ต์ข
ํ์ง์ ํ ์ธํฌ๋ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง๋ ์๋ํ์ฌ, ๋นํด ๊ธฐ์ ๋ถ์ผ์์ ํต์์ ์ง์์ ๊ฐ์ง ์๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ค์ํ ์ ์๋๋ก ๋ช
์ธ์๊ฐ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ง ์๋ํ๋ฏ๋ก, ๊ตฌ ํนํ๋ฒ ์ 6์กฐ ์ 1ํญ, ์ 8์กฐ ์ 3ํญ ๋ฐ ๊ฐ์๋ฒ์ํ๋ น ์ 1์กฐ ์ 2ํญ์ ๊ท์ ์ ์๋ฐ๋๋ค.}
2. ์ด ์ฌ๊ฑด ์ฌ๊ฒฐ์ ์ ๋ฒ ์ฌ๋ถ
๊ฐ. ์๊ณ ์ฃผ์ฅ์ ์ฌ๊ฒฐ ์ทจ์์ฌ์ ์ ์์ง
(1)์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ ๋น๋ก ๊ทธ ์์ฒด๊ฐ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์๋ํ๋๋ผ๋, ์ด๋ฅผ ์์ฑํ๋ ๊ณผ์ ์ ํ์ํ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ๊ณต์ง์ ๊ท ์ฃผ์ด๊ฑฐ๋ ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ด ์ํ๋ ๊ธฐ์ ๋ถ์ผ์์ ํต์์ ์ง์์ ๊ฐ์ง ์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , ๋ ๋ช
์ธ์์ ์ด๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ์ด ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ด ์ํ๋ ๊ธฐ์ ๋ถ์ผ์์ ํต์์ ์ง์์ ๊ฐ์ง ์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ฌํํ ์ ์๋๋ก ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๋ ๊ฒฝ์ฐ๋ผ๋ฉด ๊ทธ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ ์์ฒด์ ๊ธฐํ์ ์๊ตฌํ ๊ฒ์ ์๋๋ค.
(2)์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ฌ์ฉ๋๋ ๋ฒกํฐ์ธ pD11 ๋ฐ pBD๋ ๋น๋ก ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ์ด๋ค ๋ฒกํฐ์ ์์ธํ ์์ ๋ฐฉ๋ฒ์ด ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ง ์๋๋ผ๋ ๋๋ฉด์ ์ด๋ค ๋ฒกํฐ์ ๊ตฌ์กฐ๊ฐ ๋์๋์ด ์๊ณ , ๊ตฌ์ฑ์์๊ฐ ๋ชจ๋ ๊ณต์ง๋์ด ์ฉ์ด์
์ํ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ฏ๋ก, ๋น์
์๋ผ๋ฉด ํต์์ ์ฌ์กฐํฉ DNA ๊ธฐ์ ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ด๋ค ๋ฒกํฐ๋ฅผ ์์ ํ ์ ์์๋ ๊ฒ์ด๋ค.
(3)์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ฌ์ฉ๋๋ ์์ฃผ์ธํฌ์ธ COS-7 ๋ฐ BHK๋ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
๋น์ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์๋ ๊ฒ์ด๋ค.
(4)์ด์ ๊ฐ์ ๋ฒกํฐ pD11 ๋๋ pBD์ Apa I ๋จํธ์ ์ฝ์
ํ์ฌ ์ฌ์กฐํฉ ๋ฒกํฐ๋ฅผ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ๋ฐ ์ฌ์กฐํฉ ๋ฒกํฐ๋ก ์์ฃผ์ธํฌ๋ฅผ ํ์ง ์ ํ์ํค๋ ๊ณผ์ ์ญ์ ๋น์
๊ณ์ ํต์์ ์ธ ๊ธฐ์ ์ผ ๋ฟ ์๋๋ผ, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์ ๋ช
์ธ์ ์ค์๋ก 3 ๋ฐ 4์ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๋ค.
(5)๋ฐ๋ผ์ ๋น๋ก ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ๊ธฐํ๋์ง ์์๋๋ผ๋ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ด ๋ฏธ์์ฑ๋ฐ๋ช
์ ํด๋นํ๋ค๊ณ ํ ์ ์๊ณ , ๋ํ ๊ทธ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๊ฐ ๋ถ๋นํ ๊ฒ์ด๋ผ ํ ์ ์๋ค.
๋. ํ ๋จ
(1) ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น ์ 1์กฐ ์ 2ํญ์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ด์ฉํ ๋ฐ๋ช
์ ๋ํ์ฌ ํนํ์ถ์์ ํ๊ณ ์ ํ๋ ์๋ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ธฐ๊ด์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ธฐํํ๊ณ , ๊ทธ ๊ธฐํ์ฌ์ค์ ์ฆ๋ช
ํ๋ ์๋ฉด์ ์ถ์์์ ์ฒจ๋ถํ์ฌ์ผ ํ๋ค.๊ณ ๊ท์ ํ๋ฉด์, ๊ทธ ์ 3ํญ์ ์ 2ํญ์ ๊ฒฝ์ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ด ์ํ๋ ๊ธฐ์ ๋ถ์ผ์์ ํต์์ ์ง์์ ๊ฐ์ง ์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๋์๋ ์ด๋ฅผ ๊ธฐํํ์ง ์๋ํ ์ ์๋ค.๊ณ ๊ท์ ํ๊ณ ์๋๋ฐ, ์ด๋ ๊ทน๋ฏธ์ ์ธ๊ณ์ ์กด์ฌํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ฑ์ง์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ํ์ค์ ์กด์ฌ๊ฐ ํ์ธ๋๊ณ ์ด๋ฅผ ์ฌ์ฐจ ์
์ํ ์ ์๋ ๋ณด์ฅ์ด ์๋ ํ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ค์ํ ์ ์๋ ๊ฒฝ์ฐ์ ํด๋น๋์ด ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ ์ฐ์
์ ์ด์ฉํ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ ์ ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ ๊ท์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ถ์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋ฅผ ๋ณด์ํ๋ ๋ป์์ ์ด๋ฅผ ์ถ์์์ ๊ธฐํํ๊ฒ ํ๊ณ , ๋ค๋ง ๊ทธ ์กด์ฌ๊ฐ ํ์ธ๋๊ณ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ธฐํํ ํ์๊ฐ ์๊ฒ ํ ์ทจ์ง๋ผ๊ณ ํ ๊ฒ์ด๊ณ , ์ฌ๊ธฐ์ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด๋ผ ํจ์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ๊ณต์ง๊ณต์ฉ๋์ด ์ํ๋๊ณ ์๊ฑฐ๋ ์ ์ฉํ ์ ์๋ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๋ณด์กด๋์ด ์๋ ํํธ ์์ ๋ก์ด ๋ถ์๋๋ ๊ฒ ๋ฑ์ ๋งํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก์, ์ด์ ๊ฐ์ด ๊ธฐํ์ด ๋ฉด์ ๋๋ ์๊ฑด์ ์ถ์์ธ์ด ์ด๋ฅผ ์ฆ๋ช
ํจ์ผ๋ก์จ ์ถฉ๋ถํ๊ณ ๋ฐ๋์ ๊ทธ ์ถ์ ๋ช
์ธ์์ ์
์๋ฐฉ๋ฒ๊ณผ ์
์์ฅ์ ๋ฑ์ ๊ธฐ์ฌํ์ฌ์ผ๋ง ๊ตฌ ํนํ๋ฒ ์ 8์กฐ ์ 3ํญ์ ํด๋นํ๋ค๊ณ ํ ๊ฒ์ ์๋๋ฉฐ, ๋ํ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ํ์กดํ๋ ์ด์ ๋ฐ๋์ ๊ตญ๋ด์ ํ์กดํ๋ ๊ฒ์ด์ด์ผ ํ ํ์๋ ์๊ณ ๊ตญ์ธ์ ํ์กดํ๋ ๊ฒ์ด๋ผ ํ๋๋ผ๋ ๊ตญ๋ด์ ๋น์
์๊ฐ ์ด๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ค๊ณ ์ธ์ ๋ ๋์๋ ์ด๋ฅผ ๊ธฐํํ์ง ์๋ํ ์ ์๋ค๊ณ ๋ณด์์ผ ํ๊ณ , ๋์๊ฐ ๋ฐ๋ช
์์ ์ด์ฉํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ์๋๋ผ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์์ฑ๋ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ํด๋นํ๋ ๊ฒ์ด๋ผ ํ๋๋ผ๋ ์ด๋ฅผ ์์ฑํ๋ ๊ณผ์ ์ ํ์ํ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , ๋ ๊ทธ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ๊ณผ ๊ณต์ง์ ๊ท ์ฃผ ๋ฑ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ฌํํ ์ ์๋๋ก ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๋ค๋ฉด, ๊ฒฐ๊ตญ ๋น์
์๊ฐ ์ด๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ ๋ณผ ๊ฒ์ด์ด์ ์ด๋ฌํ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ๋ ์ ์ํ๋ น ์ 1์กฐ ์ 3ํญ ๊ท์ ์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ฒ์์ ํฌํจ๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ ์ด๋ฅผ ๊ธฐํํ์ง ์๋ํ ์ ์๋ค ํ ๊ฒ์ด๋ค( ๋๋ฒ์ 1991. 8. 27. ์ ๊ณ 90ํ1512 ํ๊ฒฐ, ๋๋ฒ์ 1992. 3. 31. ์ ๊ณ 90ํ1260 ํ๊ฒฐ ๋ฐ ๋๋ฒ์ 1997. 3. 25. ์ ๊ณ 96ํ658 ํ๊ฒฐ ๋ฑ ์ฐธ์กฐ).
(2)๋์ด์ผ ์ด ์ฌ๊ฑด์ ๋ณด๊ฑด๋, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์์ ๋ณธ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด EPO ์ ์ ์๋ฅผ ํฌํจํ๋ Apa I ๋จํธ์ ๋ฒกํฐ pD11 ๋๋ pBD์ ์ฝ์
ํ์ฌ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ธ ์ฌ์กฐํฉ ๋ฒกํฐ pD11-EP ๋๋ pBD-EP๋ฅผ ์์ ํ๊ณ ์ด๋ค ์ฌ์กฐํฉ ๋ฒกํฐ๋ก ์์ฃผ์ธํฌ์ธ COS-7 ๋๋ BHK๋ฅผ ํ์ง์ ํ์์ผ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ธ ํ์ง์ ํ๋ ์์ฃผ์ธํฌ๋ฅผ ๋ง๋ค๊ณ ์ด๋ก๋ถํฐ EPO๋ฅผ ๋๋ ์์ฐํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๊ดํ ๊ฒ์ธ๋ฐ, ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ธ ์ฌ์กฐํฉ ๋ฒกํฐ ๋๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ธ ํ์ง์ ํ๋ ์์ฃผ์ธํฌ๋ ๋ฌผ๋ก ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ด์ฉ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ทธ ์ด๋ ๊ฒ๋ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ตญ๋ด๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๊ธฐํ๋์ง ์์ ์ฌ์ค์ ๋น์ฌ์ ์ฌ์ด์ ๋คํผ์ด ์์ผ๋ฏ๋ก, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ธ 1987. 6. 27.๊ฒฝ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง์ธ ์ธ๊ฐ ๊ฒ๋๋ผ์ด๋ธ๋ฌ๋ฆฌ์ Apa I ๋จํธ, ๋ฒกํฐ pD11๊ณผ pBD, ์์ฃผ์ธํฌ์ธ COS-7๊ณผ BHK๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ธ์ง ์ฌ๋ถ์ ๊ทธ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ค๊ฐ์์ฑ๋ฌผ์ธ ์ฌ์กฐํฉ ๋ฒกํฐ๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ธ ํ์ง์ ํ๋ ์์ฃผ์ธํฌ๋ฅผ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ฌํํ ์ ์๋๋ก ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๋์ง ์ฌ๋ถ์ ๊ดํ์ฌ ์ดํด๋ณธ๋ค.
(๊ฐ)์ฐ์ , ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ค ์ธ๊ฐ ๊ฒ๋๋ผ์ด๋ธ๋ฌ๋ฆฌ์ Apa I ๋จํธ์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ์ค์๋ก 1๊ณผ ์ค์๋ก 2์ ๊ธฐ์ฌ๋ ๊ธฐ์ ์ ์ํ์ฌ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๋ ์ ์ ๋ํ์ฌ๋ ๋น์ฌ์ ์ฌ์ด์ ๋คํผ์ด ์๋ค.
(๋) ๋ค์, ๋ฒกํฐ pD11์ ๋ํ์ฌ ๋ณธ๋ค.
์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ํนํ๊ณต๋ณด์๋ ํ๋ผ์ค๋ฏธ๋ ํ์ง๋ฐํ ๋ฒกํฐ pD11๋ ์ ์ ํ ํ๋ผ์ค๋ฏธ๋(Nucleic Acids Research 13๏ผ841-857, 1985, ๋ณธ์์์ ์ฐธ๊ณ ๋ก ์ธ์ฉ๋จ)๋ก๋ถํฐ ์ ๋๋์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค-2์ ์ฃผ์ ํ๊ธฐ ํ๋ก๋ชจํฐ ๋ฐ 3๋ถ๋ถ์ ๋ฆฌ๋ ์์ด๋ฟ๋ง ์๋๋ผ, ์๋ฏธ์ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค 40(SV-40) ์ด์ง์ธ์ ์์ด ๋ฐ ๋ณต์ ์ค๋ฆฌ์ง์ ํจ์ ํ๋ค.(์ ์ 3ํธ์ฆ ์ 244๋ฉด ์ 17ํ ๋ด์ง ์ 19ํ), ํ๋ผ์ค๋ฏธ๋ pD11์ 350 bp์ ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค ์ข์ธก๋ง๋จ(0-1), SV-40(E)์ผ๋ก๋ถํฐ์ ์ค๋ฆฌ์ง ๋ฐ ์ด์ง์ธ์ ์์ด, ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค-2์ ์ฃผ์ ํ๊ธฐ ํ๋ก๋ชจํฐ(MLP), ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค-3 ์ธ๋ถ๋ถ์ ๋ฆฌ๋(L 1-3), ๋ฐ ์ธ๋ฒ์งธ ๋ฆฌ๋ 5' ์คํ๋ผ์ด์ค(splice) ๋ถ์(5' SS), ๋ฉด์ญ๊ธ๋ก๋ธ๋ฆฐ 3' ์คํ๋ผ์ด์ค ๋ถ์(3' SS) ๋ฐ pML์ Eco RI(RI) ์ ํ ๋ถ์ ๋ด์ ํ๊ธฐ SV-40 ํด๋ฆฌ์๋ฐ๋ํ ์๊ทธ๋ (pA)์ ํจ์ ํ๋ค.(์ ์ 3ํธ์ฆ ์ 244๋ฉด ์ 25ํ ๋ด์ง ์ 28ํ)๊ณ ๊ธฐ์ฌํ๊ณ ์์ด, ์ด ๊ธฐ์ฌ์ ์ถ์์์ ์ฒจ๋ถ๋ ๋๋ฉด ์ 2๋๋ฅผ ๋ณด๋ฉด, ๋ฒกํฐ pD11์ด pDHFR-III{์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์์ ์ธ์ฉํ๊ณ ์๋ ์ 'Nucleic Acids Research 13๏ผ841-857, 1985'์ ์ถ์์์ ์ฒจ๋ถ๋ ๋๋ฉด ์ 2๋์ ์ํ๋ฉด, pDHFR-III๋ โ ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค ์ข์ธก๋ง๋จ(0-1), โก ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค-2์ ์ฃผ์ ํ๊ธฐ ํ๋ก๋ชจํฐ(MLP), โข ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค-3 ์ธ๋ถ๋ถ์ ๋ฆฌ๋(L 1-3), โฃ ์ธ๋ฒ์งธ ๋ฆฌ๋ 5' ์คํ๋ผ์ด์ค(splice) ๋ถ์(5' SS), โค ๋ฉด์ญ๊ธ๋ก๋ธ๋ฆฐ 3' ์คํ๋ผ์ด์ค ๋ถ์(3' SS) ๋ฐ โฅ pML์ Eco RI(RI) ์ ํ ๋ถ์ ๋ด์ ํ๊ธฐ SV-40 ํด๋ฆฌ์๋ฐ๋ํ ์๊ทธ๋ (pA) ๋ฑ 6๊ฐ์ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ๊ฒ์์ ์ ์ ์๋ค}์ SV40 ์ค๋ฆฌ์ง ๋ฐ ์ด์ง์ธ์ ์์ด๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ๊ฒ์์ ์ ์ ์๋ค.
๊ทธ๋ฐ๋ฐ ์๊ณ ๋ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ฌ์ฉ๋๋ ๋ฒกํฐ์ธ pD11์ ์ถ์์์ ์ฒจ๋ถ๋ ๋๋ฉด ์ 2๋๋ก๋ถํฐ ์ ์ ์๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด pDHFR-III์ SV40 ์ค๋ฆฌ์ง ๋ฐ ์ด์ง์ธ์ ์์ด์ ๊ทธ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง๋ก ํ๋๋ฐ, ๋น๋ก ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ๋ฒกํฐ pD11 ๋๋ ๊ทธ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ํ ๊ธฐ์ฌ๊ฐ ์๋๋ผ๋, pDHFR-III๋ ๊ทธ ์ ์กฐ๋ฐฉ๋ฒ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋ ์ฐธ๊ณ ๋ฌธํ์ธ Nucleic Acides Res Vol.13, 841-857, 1985(๊ฐ ์ 9ํธ์ฆ)์ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๊ณ , SV40 ์ค๋ฆฌ์ง ๋ฐ ์ด์ง์ธ์ ์์ด์ ๋ฌธํ Proc.Natl.Acad.Sci. Vol.80, 721-725, 1983(๊ฐ ์ 10ํธ์ฆ)์ ํตํ์ฌ ์ ์ ์๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์์ผ ์ด์ ์ ๊ณต์ง๋ ๊ฒ์ผ ๋ฟ ์๋๋ผ, ATCC ๊ธฐ๊ด์ฅ์ ์ง์ ์(๊ฐ ์ 11ํธ์ฆ) ๋ฐ ATCC ์นดํ๋ก๊ทธ(๊ฐ ์ 12ํธ์ฆ)์์ ์ ์ ์๋ฏ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์์ผ ์ด์ ์ ATCC์ ๊ธฐํ๋์ด ๋๊ตฌ๋ ๋ถ์๋ฐ์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ฏ๋ก, pD11์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ์ฃผ์ฅํ๋ค.
์ดํผ๊ฑด๋, pDHFR-III์ ๊ด๋ จํ์ฌ, ๊ฐ ์ 9ํธ์ฆ์๋ pDHFR-III์ ์ ์กฐํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ด ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ผ๋, ๊ฐ ์ 9ํธ์ฆ์ ๊ธฐ์ฌ๋ก๋ pDHFR-III์ ์ ์กฐํ๊ธฐ ์ํ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง์ธ โ ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค ์ข์ธก๋ง๋จ(0-1), โก ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค-2์ ์ฃผ์ ํ๊ธฐ ํ๋ก๋ชจํฐ(MLP), โข ์๋ฐ๋
ธ๋ฐ์ด๋ฌ์ค-3 ์ธ๋ถ๋ถ์ ๋ฆฌ๋(L 1-3), โฃ ์ธ๋ฒ์งธ ๋ฆฌ๋ 5' ์คํ๋ผ์ด์ค(splice) ๋ถ์(5' SS), โค ๋ฉด์ญ๊ธ๋ก๋ธ๋ฆฐ 3' ์คํ๋ผ์ด์ค ๋ถ์(3' SS) ๋ฐ โฅ pML์ Eco RI(RI) ์ ํ ๋ถ์ ๋ด์ ํ๊ธฐ SV-40 ํด๋ฆฌ์๋ฐ๋ํ ์๊ทธ๋ (pA) ๋ฑ 6๊ฐ์ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ธ์ง์ ๋ํด์๋ ์ ์ ์๋ค.
๊ทธ๋ฆฌ๊ณ SV-40 DNA์ ๊ด๋ จํ์ฌ, ๊ฐ ์ 11ํธ์ฆ์ pBR322์ ์์ ๋ถ์ ํ๋ค๋ ATCC ๊ธฐ๊ด์ฅ์ ์ง์ ์์ผ๋ฟ SV-40๊ณผ๋ ๋ฌด๊ดํ ๊ฒ์ด๊ณ , ๊ฐ ์ 12ํธ์ฆ์ pBR322์ SV-40 DNA๊ฐ ์ฝ์
๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ดํ ATCC ์นดํ๋ก๊ทธ๋ก ๋ณด์ด์ง๋ง ์ด ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ ๋๊ตฌ์๊ฒ๋ ๋ถ์๋๋ ๊ฒ์ธ์ง๋ ์ ์ ์๋ค.
๋ฐ๋ผ์ ์ ๊ฐ ์ฆ๊ฑฐ์ ์ํ์ฌ๋ ๋น์
์๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ pD11์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ์ ์ ์ธ์ ํ ์ ์๊ณ , ๋ฌ๋ฆฌ ์ด๋ฅผ ์ธ์ ํ ์ฆ๊ฑฐ๊ฐ ์์ผ๋ฏ๋ก, ์๊ณ ์ ์ ์ฃผ์ฅ์ ์ด์ ์๋ค.
(๋ค) ๋ค์, ๋ฒกํฐ pBD์ ๋ํ์ฌ ๋ณธ๋ค.
์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ํนํ๊ณต๋ณด์๋ pBD๋ MT-I ํ๋ก๋ชจํฐ ์์ด(๋ณธ์์ ์ฐธ๊ณ ๋ก ์ธ์ฉ๋ ๊ธ๋๋น, ๋ํจ ๋ฐ ํ๋ฏธํฐ, Nature 292๏ผ267-269, 1981) ๋ฐ pUC ํ๋ผ์ค๋ฏธ๋์ ์กด์ฌํ๋ DHFR ์ ๋ฐ๊ฐ๋ฅํ ํ์ง์์ด์ ํจ์ ํ๋ค.(์ ์ 3ํธ์ฆ ์ 244๋ฉด ์ 32ํ ๋ด์ง ์ 33ํ)๊ณ ๊ธฐ์ฌํ๊ณ ์์ด, ์ด ๊ธฐ์ฌ์ ์ถ์์์ ์ฒจ๋ถ๋ ๋๋ฉด ์ 3๋๋ฅผ ๋ณด๋ฉด pBD๋ฅผ ์ ์กฐํ๋ ์ถ๋ฐ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด โ pUC, โก DHFR ์์ด, โข SV40 ์ ๋ ์ด์ง์ธ์ ์์ด ๋ฐ ์ค๋ฆฌ์ง, โฃ MT-I ํ๋ก๋ชจํฐ ์์ด ๋ฐ โค Bํ ๊ฐ์ผ ํ๋ฉด ํญ์ ํด๋ฆฌ์๋ฐ๋ํ ์์ด ๋ฑ 5๊ฐ์ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ๊ฒ์์ ์ ์ ์๋ค.
๊ทธ๋ฐ๋ฐ ์๊ณ ๋ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ๋ฒกํฐ pBD ๋๋ ๊ทธ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ํ ๊ธฐ์ฌ๊ฐ ์๋๋ผ๋, ๋ฒกํฐ์ธ pBD๋ ๋ฌธํ Journal of Bacteriology Vol.141, 246-253 1980(๊ฐ ์ 14ํธ์ฆ)์์ ํ์ธํ ์ ์๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ์ ์ ๊ณต์ง๋ ๊ฒ์ผ ๋ฟ ์๋๋ผ, ATCC ์นดํ๋ก๊ทธ(๊ฐ ์ 13ํธ์ฆ)์์ ์ ์ ์๋ฏ์ด ATCC์ ๊ธฐํ๋์ด ๋๊ตฌ๋ ATCC๋ก๋ถํฐ ๋ถ์๋ฐ์ ์ ์์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , pBD์ ๊ตฌ์ฑ์์๋ ๋๋ฉด ์ 3๋์ ๋์๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด โ pUC ํ๋ผ์ค๋ฏธ๋, โก DHFR ์์ด, โข SV40 ์ ๋ ์ด์ง์ธ์ ์์ด ๋ฐ ์ค๋ฆฌ์ง, โฃ MT-I ํ๋ก๋ชจํฐ ์์ด ๋ฐ โค Bํ ๊ฐ์ผ ํ๋ฉด ํญ์ ํด๋ฆฌ์๋ฐ๋ํ ์์ด๋ค๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง๋๋ฐ DHFR ์์ด๊ณผ SV40 ์ ๋ ์ด์ง์ธ์ ์์ด ๋ฐ ์ค๋ฆฌ์ง์ ๋ฌธํ Molecular And Cellular Biology Vol.4, 854-864, 1981(๊ฐ ์ 15ํธ์ฆ)์์, MT-I ํ๋ก๋ชจํฐ ์์ด์ ๋ฌธํ Nature Vol.292, 267-269, 1981(๊ฐ ์ 16ํธ์ฆ)์์, Bํ ๊ฐ์ผ ํ๋ฉด ํญ์ ํด๋ฆฌ์๋ฐ๋ํ ์์ด์ ๋ฌธํ Nature Vol.281, 646-650, 1979(๊ฐ ์ 17ํธ์ฆ) ๋ฐ Nature 1981(๊ฐ ์ 18ํธ์ฆ)์์, pUC๋ ๋ฌธํ Molecular Cloning, second edition 1989(๊ฐ ์ 19ํธ์ฆ)์์ ๋ณผ ์ ์๋ฏ์ด ๊ณต์ง๋ ๊ฒ์ผ ๋ฟ ์๋๋ผ, ๊ตฌ์ฑ์์์ธ SV40 ์์ด์ ATCC ๊ธฐ๊ด์ฅ์ ์ง์ ์(๊ฐ ์ 11ํธ์ฆ), ATCC ์นดํ๋ก๊ทธ(๊ฐ ์ 12, 21, 23ํธ์ฆ) ๋ฐ ATCC ๊ธฐ๊ด์ฅ์ ์ง์ ์(๊ฐ ์ 20, 22ํธ์ฆ)์์ ํ์ธํ ์ ์๋ฏ์ด ๊ตฌ์ฑ์์์ธ SV40 ์์ด, Bํ ๊ฐ์ผ ํ๋ฉด ํญ์ ํด๋ฆฌ์๋ฐ๋ํ ์์ด ๋ฐ pUC ๋ฒกํฐ ๋ชจ๋ ATCC์ ๊ธฐํ๋์ด ๋๊ตฌ๋ ๋ถ์๋ฐ์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , ๋ํ ๋ฌธํ Nature Vol.292, 267-269, 1981(๊ฐ ์ 16ํธ์ฆ)์๋ ๊ทธ ์ฃผ์ ์ ์๊ฐ ๋ฆฌ์ฐจ๋ ํ๋ฏธํฐ ๋ฐ์ฌ์๋ค๋ ๊ฒ์ด ๋ํ๋ ์๊ณ , ๋ฆฌ์ฒ๋ ํ๋ฏธํฐ ๋ฐ์ฌ์ ์ง์ ์(๊ฐ ์ 28ํธ์ฆ)์์ ์ ์ ์๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด ๋ฆฌ์ฒ๋ ํ๋ฏธํฐ ๋ฐ์ฌ๋ ๋น์
์์๊ฒ ์ํ์ ์ ๊ณตํด ์ฃผ์์ผ๋ฏ๋ก ๋น์
์๋ผ๋ฉด ๋ฆฌ์ฒ๋ ํ๋ฏธํฐ ๋ฐ์ฌ์๊ฒ ์์ฒญํจ์ผ๋ก์จ ๋ฒกํฐ pBD๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์๋ ์์๋ ๊ฒ์ด๋ฏ๋ก, pBD๋ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ์ฃผ์ฅํ๋ค.
์ดํผ๊ฑด๋, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋ ๋ฒกํฐ๋ pBD์ด๋, ๊ฐ ์ 13ํธ์ฆ์ ๊ธฐ์ฌ์ ์ํ๋ฉด, ATCC ๊ธฐํ ๋ฏธ์๋ฌผ์ pBD8์ด๊ณ , ๊ฐ ์ 14ํธ์ฆ์ ๊ธฐ์ฌ์ ์ํ๋ฉด(์ 248๋ฉด์ ํ2), pBD๋ pBD6, pBD8, pBD9 ๋ฑ ์์ข
์ pBD๊ฐ ์กด์ฌํ๋ ๊ฒ์ด๋ฏ๋ก, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋ pBD๊ฐ ATCC์ ๊ธฐํ๋ pBD8๊ณผ ๋์ผํ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ ์ ์์ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ, ๊ฐ ์ 13ํธ์ฆ์ ๊ธฐ์ฌ๋ง์ผ๋ก๋ pBD๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ๋๊ตฌ์๊ฒ๋ ๋ถ์๋๋ ๊ฒ์ธ์ง ์ ์ ์๋ค.
๋ํ, ๊ฐ ์ 28ํธ์ฆ์ ์ฐ๊ตฌ๋ชฉ์ ์ ์ด๋ค ๋น์
์์๊ฒ๋ ์์ ๋ก์ด ๋ถ์ํ์๋ค๋ ํ๋ฏธํฐ ๋ฐ์ฌ์ ์ง์ ์์ด๋, ์ฐ๊ตฌ๋ชฉ์ ์ด๋ผ๋ ๊ฐ์ธ์ ์ธ ๋ฐฉ์นจ์ ์ํ์ฌ ๋ถ์ํ๋ ๊ฒ์ ์์ ๋ก์ด ๋ถ์ํ๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋ณผ ์๋ ์๊ณ , ์ ์ง์ ์์๋ '๋ฒกํฐ pBD๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์์
์ ๋ชฉ์ ์ ์ํ ๊ฒ์ด๊ณ , ์์ฒญํ ๋ฒกํฐ๊ฐ ๋ค๋ฅธ ์์
๋จ์ฒด์ ์ํด ์ ํ๋ ๋
์ ์์ด์ ํฌํจํ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ๋ฆฌ์ฒ๋ ํ๋ฏธํฐ ๋ฐ์ฌ๋ ๊ทธ ๋จ์ฒด์ ํ๋ฝ์ ๋ฐ์์ผ ํ๋ค.'๊ณ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ด, ๋ฆฌ์ฒ๋ ํ๋ฏธํฐ ๋ฐ์ฌ๋ ๋๊ตฌ์๊ฒ๋ ์์ ๋ก์ด ๋ถ์ํด ์ฃผ๋ ๊ฒ์ ์๋๋ผ๊ณ ํ ๊ฒ์ด๋ฏ๋ก, ๋ฆฌ์ฒ๋ ํ๋ฏธํฐ ๋ฐ์ฌ๋ก๋ถํฐ๋ pBD๋ฅผ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋ณผ ์ ์๋ค.
๊ทธ๋ฆฌ๊ณ pBD์ ๊ตฌ์ฑ์์์ ๊ด๋ จํ์ฌ, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋ ๊ตฌ์ฑ์์๋ pUC์ด๋ ๊ฐ ์ 22, 23ํธ์ฆ์ ๊ฐ ๊ธฐ์ฌ์ ์ํ๋ฉด, ATCC ๊ธฐํ ๋ฏธ์๋ฌผ์ pUC9์ด๋ฏ๋ก ๋์ผํ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ATCC์ ๊ธฐํ๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋ณผ ์ ์๊ณ , DHFR ๋ฐ MT-I์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์์๋ค๊ณ ๋ณผ ๋งํ ์ฆ๊ฑฐ๊ฐ ์์ผ๋ฉฐ, SV-40 DNA์ ๊ด๋ จํ์ฌ ์ (๋)ํญ์์ ์ดํด๋ณธ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด, ๊ฐ ์ 11ํธ์ฆ์ pBR322์ ์์ ๋ถ์ ํ๋ค๋ ATCC ๊ธฐ๊ด์ฅ์ ์ง์ ์์ผ๋ฟ SV-40๊ณผ๋ ๋ฌด๊ดํ ๊ฒ์ด๊ณ , ๊ฐ ์ 12ํธ์ฆ์ pBR322์ SV-40 DNA๊ฐ ์ฝ์
๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ดํ ATCC ์นดํ๋ก๊ทธ๋ก ๋ณด์ด๋ ์ด ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ ๋๊ตฌ์๊ฒ๋ ๋ถ์๋๋ ๊ฒ์ธ์ง๋ ์ ์ ์์ผ๋ฏ๋ก, ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง์ ์
์ํ์ฌ pBD๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์์ ํ ์๋ ์๋ค๊ณ ํ ๊ฒ์ด๋ค.
๋ฐ๋ผ์ ์ ๊ฐ ์ฆ๊ฑฐ๋ค์ ์ํ์ฌ๋ ๋น์
์๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ pDB๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ์ ์ ์ธ์ ํ ์ ์๊ณ , ๋ฌ๋ฆฌ ์ด๋ฅผ ์ธ์ ํ ์ฆ๊ฑฐ๊ฐ ์์ผ๋ฏ๋ก, ์๊ณ ์ ์ ์ฃผ์ฅ๋ ์ด์ ์๋ค.
(๋ผ) ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์์ฃผ์ธํฌ์ธ COS-7 ๋ฐ BHK์ ๋ํ์ฌ ๋ณธ๋ค.
์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ํนํ๊ณต๋ณด์๋ ํฌ์ ๋๋ฌผ ์ธํฌ์ฃผ, ์ฆ COS-7(์์ญ์ด ์ ์ฅ) ๋ฐ BHK(์ด๋ฆฐ ํ์คํฐ์ ์ ์ฅ)์ 10% ์ ํ์ ํ์ฒญ์ ํจ์ ํ๋ ๋๋ฒ ์ฝ์ ๋ณํ๋ ํ์ ๋ฐฐ์ง์์ ๋ฐฐ์์์ผฐ๋ค.(์ ์ 3ํธ์ฆ ์ 245๋ฉด ์ 10ํ ๋ด์ง ์ 12ํ)๋ผ๊ณ ๋ง ๊ธฐ์ฌํ๊ณ ์๋ค.
๊ทธ๋ฐ๋ฐ ์๊ณ ๋ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ์์ฃผ์ธํฌ์ธ BHK ๋ฐ COS-7์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ํ ๊ธฐ์ฌ๊ฐ ์๋๋ผ๋, COS-7์ ๋ฌธํ Nucleic Acides Res Vol.13, 8573-8586, 1985(๊ฐ ์ 4ํธ์ฆ)์ ์ํ์ฌ ๊ณต์ง๋ ๊ฒ์ผ ๋ฟ ์๋๋ผ, ATCC ๊ธฐ๊ด์ฅ์ ์ง์ ์(๊ฐ ์ 24ํธ์ฆ)์์ ์ ์ ์๋ฏ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์์ผ ์ด์ ์ธ 1983. 3. 8. ๊ตญ์ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ธ ATCC์ ๊ธฐํ๋์ด ๊ธฐํ์ผ ์ดํ๋ถํฐ ๋๊ตฌ๋ ๋ถ์๋ฐ์ ์ ์์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , BHK๋ ๋ฌธํ Journal of Biological Standardization Vol.4, 51-56, 1976(๊ฐ ์ 2ํธ์ฆ) ๋ฐ Virology Vol.16, 147-151, 1962(๊ฐ ์ 3ํธ์ฆ)์์ ์ ์ ์๋ฏ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ์ ์ ๋ฐํ๋ ๋
ผ๋ฌธ๋ค์ ์ํ์ฌ ๊ณต์ง๋ ๊ฒ์ผ ๋ฟ ์๋๋ผ, ATCC ์นดํ๋ก๊ทธ(๊ฐ ์ 6ํธ์ฆ) ๋ฐ ์ ๊ฐ ์ 24ํธ์ฆ์์ ์ ์ ์๋ฏ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์์ผ ์ด์ ์ธ 1965. 6. 10. ๊ตญ์ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ธ ATCC์ ๊ธฐํ๋์ด ๊ธฐํ์ผ ์ดํ๋ถํฐ ๋๊ตฌ๋ ๋ถ์๋ฐ์ ์ ์์๋ ๊ฒ์ด๋ฏ๋ก, ์ด๋ค ์์ฃผ์ธํฌ๋ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ์ฃผ์ฅํ๋ค.
์ดํผ๊ฑด๋, ๊ฐ ์ 24ํธ์ฆ์ ๊ธฐ์ฌ์ ์ํ๋ฉด, COS-7์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์์ผ ์ด์ ์ธ 1983. 3. 8. ๊ตญ์ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ธ ATCC์ ๊ธฐํ๋์ด ๊ธฐํ์ผ ์ดํ๋ถํฐ ๋๊ตฌ๋ ๋ถ์๋ฐ์ ์ ์์๋ ๊ฒ์ด๋ฏ๋ก ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋ ์ธ์ ๋๋ค.
๊ทธ๋ฌ๋ BHK์ ๊ดํ์ฌ๋, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์์๋ ์์ฃผ์ธํฌ๋ก์ BHK๋ฅผ ์ฌ์ฉํ๊ณ ์๋๋ฐ ๋ฐํ์ฌ, ์ ๊ฐ ์ 24ํธ์ฆ์ ๊ธฐ์ฌ๋ ์์ฃผ์ธํฌ๋ BHK- 21์ด๋ฏ๋ก ๊ทธ ํ๊ธฐ๊ฐ ์์ดํ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ, ATCC์์ ๋ฐํํ ์นดํ๋ก๊ทธ์ธ ์ ์ 10ํธ์ฆ์ ๊ธฐ์ฌ์ ์ํ๋ฉด BHK๋ CRL6281๋ก ๊ธฐํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ตฌ์ฒด์ ์ธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ฑ์์ ์ ์ ์๊ณ , BHK-21์ ๊ธฐํ๋ฒํธ CCL10๊ณผ CRL8544๋ก ๊ธฐํ๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ด ์๋ก ์์ดํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ทจ๊ธํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋ค๋ฅธ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ธ ECACC์์ ๋ฐํํ ์นดํ๋ก๊ทธ์ธ ์ ์ 11ํธ์ฆ์ ๊ธฐ์ฌ์ ์ํ๋๋ผ๋ BHK21, BHK TK-, BHK/AC9, BHK 21 STRAIN 31 ๋ฑ BHK ๊ด๋ จ ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ๊ธฐํ๋์ด ์์ด ์๋ก ์์ดํ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ตฌ๋ณํ๊ณ ์์ผ๋ฏ๋ก, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์์ ๊ธฐ์ฌ๋ BHK์ ATCC์ ๊ธฐํ๋ BHK-21์ด ๋์ผํ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋จ์ ํ ์ ์๋ค.
๋ฐ๋ผ์ ์ ๊ฐ ์ฆ๊ฑฐ์ ์ํ์ฌ๋ ๋น์
์๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ BHK๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ์ ์ ์ธ์ ํ ์ ์๊ณ , ๋ฌ๋ฆฌ ์ด๋ฅผ ์ธ์ ํ ์ฆ๊ฑฐ๊ฐ ์์ผ๋ฏ๋ก, ์๊ณ ์ ์ ์ฃผ์ฅ๋ ์ด์ ์๋ค.
(๋ง)๋ง์ง๋ง์ผ๋ก, ์ฌ์กฐํฉ ๋ฒกํฐ์ธ pD11-EP ๋ฐ pBD-EP์ ๋ํ์ฌ ๋ณธ๋ค.
์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์ ์ค์๋ก 3์ ์ ์กฐํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ด ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๊ณ , ์ต์ข
ํ์ง์ ํ๋ ์์ฃผ์ธํฌ๋ ์ค์๋ก 4์ ์ ์กฐ๋ฐฉ๋ฒ์ด ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ผ๋, ์์ ๋ณธ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด ์์ฃผ์ธํฌ์ธ BHK์ ๋ฒกํฐ์ธ pD11 ๋ฐ pBD๋ฅผ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ฏ๋ก ์ฌ์กฐํฉ ๋ฒกํฐ์ธ pD11-EP, pBD-EP ๋ฐ ํ์ง์ ํ๋ ์์ฃผ์ธํฌ๋ ๋น์
์๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ ๊ฒ์ด๋ค.
(3) ๊ธฐํ ์๊ณ ์ฃผ์ฅ์ ๋ํ ํ๋จ
์๊ณ ๋ ๋ฌธํ์ ๊ณต์ง๋ ๋ฏธ์๋ฌผ๋ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ์ฃผ์ฅํ๋,
์์ ๋ณธ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น ์ 1์กฐ ์ 3ํญ์ ํด๋นํ๊ธฐ ์ํด์๋ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์กด์ฌ๊ฐ ํ์ธ๋๊ณ , ์ด๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์์ด ์ฆ๋ช
๋์ด์ผ ํ ๊ฒ์ธ๋ฐ, ์ด๋ค ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ๋ฌธํ์ ๊ณต์ง๋ ๊ฒ์ ์ํ์ฌ ๊ทธ ์กด์ฌ๊ฐ ํ์ธ๋์๋ค๊ณ ๋ ํ ์ ์์ผ๋, ๋ฌธํ๊ณต์ง ์ฌ์ค๋ง์ผ๋ก ์ด๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋ณผ ์๋ ์์ผ๋ฏ๋ก, ์๊ณ ์ ์ ์ฃผ์ฅ์ ์ด์ ์๋ค.
๋ํ, ์๊ณ ๋ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ด ์ธ๊ตญ์์ ํนํ๋ฅผ ๋ฐ์์ผ๋ฏ๋ก ๋ช
์ธ์ ๊ธฐ์ฌ ์๊ฑด์ ์ถฉ์กฑํ๋ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ์ฃผ์ฅํ๋, ์ฐ๋ฆฌ ๋๋ผ์์ ํนํ๋ฅผ ๋ฐ์ ์ ์๋์ง ์ฌ๋ถ๋ฅผ ํ๋จํจ์ ์์ด์๋ ๋ฒ์ ์ ๊ด์ต์ ๋ฌ๋ฆฌํ๋ ๋ค๋ฅธ ๋๋ผ์ ์ฌ์ฌ๋ก์ ๊ตฌ์ ๋ฐ์ ๊ฒ์ ์๋๋ผ๊ณ ํ ๊ฒ์ด๋ฏ๋ก, ์๊ณ ์ ์ ์ฃผ์ฅ๋ ์ด์ ์๋ค.
๋ค. ์๊ฒฐ๋ก
๋ฐ๋ผ์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๊ด๋ จ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ตญ๋ด๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์๋ํ๊ณ , ๋น์
์๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ ๋ฒกํฐ์ธ pD11 ๋ฐ pBD, ์์ฃผ์ธํฌ์ธ BHK๋ฅผ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์์ ์ฆ๋ช
ํ ์ ์๋ ์๋ฃ๋ ์์ผ๋ฏ๋ก, ๋ ๋์๊ฐ ๋ฐ๋ช
์ ์์ธํ ์ค๋ช
๋ฐ ๋๋ฉด์ ์ํ์ฌ ์ด๋ค ๋ฌผ์ง์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ๋๋ ์ด๋ค ๋ฌผ์ง์ ์ด์ฉํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ ๋ฑ์ ๋ํ ๊ธฐ์ฌ๊ฐ ์๋์ง ์ฌ๋ถ์ ๋ํ์ฌ๋ ์ดํด๋ณผ ํ์๋ ์์ด, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋ช
์ธ์๋ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ค์ํ ์ ์์ ์ ๋๋ก ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ง ์๋ค๊ณ ํ ๊ฒ์ด์ด์, ์ด์ ๊ฒฐ๋ก ์ ๊ฐ์ด ํ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ฌ๊ฒฐ์ ์ ๋นํ๋ค.
3. ๊ฒฐ ๋ก
๊ทธ๋ ๋ค๋ฉด ์๊ณ ์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ฒญ๊ตฌ๋ ์ด์ ์๋ค.
ํ์ฌ ๊ตฌ์ฑ์(์ฌํ์ฅ) ์ ์์ผ ์ด๋ํ
|
|
๋๊ธ 0๊ฐ
๋ก๊ทธ์ธ ํ์๋ฉด, ํ๋ก ๋๊ธ์ ๋ฑ๋กํ์ค ์ ์์ต๋๋ค.
๋ค์ด๋ฒ ๊ฒ์
๋ธ๋ก๊ทธ
์นดํ
๋ด์ค
์น์ฌ์ดํธ
|
|
[ ์ฐธ์กฐํ๋ก ์ฒด๊ณ๋ ]
-
[ ๋ฒ๊ด/๋๋ฒ๊ด ํ๊ทธ]
|