|
+
-
๋ถ๋งํฌ ์ ์ฅ
ํนํ์๊ณ ์ฌ๊ฑด
๋๋ฒ์ 2002. 11. 8. ์ ๊ณ 2001ํ2238 ํ๊ฒฐ
[๊ฑฐ์ ์ฌ์ (ํน)][๊ณต2003.1.1.(169),102]
ใํ์์ฌํญใ
[1] ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น ์ 1์กฐ ์ 2ํญ, ์ 3ํญ์ ๊ท์ ์ทจ์ง ๋ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ด์ฉํ ๋ฐ๋ช
์ ์์ด์ ์ถ๋ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , ๋ ๋ช
์ธ์์ ์ด๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ค๊ฐ ์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ฌํํ ์ ์๋๋ก ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๋ ๊ฒฝ์ฐ, ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ ์์ฑ๋ฌผ์ ๊ธฐํ ์๋ถ(์๊ทน)
[2] ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ฌ์ฉ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ค ๋ฒกํฐ pD11 ๋๋ pBD๊ฐ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ตญ๋ด ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์๋ํ๊ณ ๋น์
์๊ฐ ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์๋ ์์ด ๊ทธ ํนํ๋ฑ๋ก์ด ๊ฑฐ์ ๋์ด์ผ ํ๋ค๊ณ ํ ์ฌ๋ก
ใํ๊ฒฐ์์งใ
[1] ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น(1987. 7. 1. ๋ํต๋ น๋ น ์ 12199ํธ๋ก ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 1์กฐ ์ 2ํญ, ์ 3ํญ์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ด์ฉํ ๋ฐ๋ช
์ ๋ํ์ฌ ํนํ์ถ์์ ํ๊ณ ์ ํ๋ ์๋ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ธฐํํ๊ณ ๊ทธ ๊ธฐํ์ฌ์ค์ ์ฆ๋ช
ํ๋ ์๋ฉด์ ์ถ์์์ ์ฒจ๋ถํ์ฌ์ผ ํ๋ฉฐ, ๋ค๋ง ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ด ์ํ๋ ๊ธฐ์ ๋ถ์ผ์์ ํต์์ ์ง์์ ๊ฐ์ง ์(๋น์
์)๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๋์๋ ๊ธฐํ์ ํ์ง ์๋ํ ์ ์๋ค๊ณ ๊ท์ ํ๊ณ ์๋๋ฐ, ์ด ๊ท์ ์ ์ทจ์ง๋ ๊ทน๋ฏธ์ ์ธ๊ณ์ ์กด์ฌํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ฑ์ง์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ํ์ค์ ์กด์ฌ๊ฐ ํ์ธ๋๊ณ ์ด๋ฅผ ์ฌ์ฐจ ์
์ํ ์ ์๋ค๋ ๋ณด์ฅ์ด ์๋ ํ ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ ์ฌํํ์ฌ ์ฐ์
์ ์ด์ฉํ ์ ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ด๋ผ ํ ๊ฒ์ด๊ณ , ๋ค๋ง ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ ์์ฑ๋ฌผ์ ๋น๋ก ๊ทธ ์์ฒด๊ฐ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์๋ํ๋๋ผ๋ ์ด๋ฅผ ์์ฑํ๋ ๊ณผ์ ์ ํ์ํ ์ถ๋ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , ๋ ๋ช
์ธ์์ ์ด๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ค๊ฐ ์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ฌํํ ์ ์๋๋ก ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๋ ๊ฒฝ์ฐ๋ผ๋ฉด ๊ทธ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ ์์ฑ๋ฌผ ์์ฒด์ ๊ธฐํ์ ์๊ตฌํ ๊ฒ์ ์๋๋ค.
[2] ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ฌ์ฉ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ค ๋ฒกํฐ pD11 ๋๋ pBD๊ฐ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ตญ๋ด ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์๋ํ๊ณ ๋น์
์๊ฐ ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์๋ ์์ด ๊ทธ ํนํ๋ฑ๋ก์ด ๊ฑฐ์ ๋์ด์ผ ํ๋ค๊ณ ํ ์ฌ๋ก.
ใ์ฐธ์กฐ์กฐ๋ฌธใ
[1] ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น(1987. 7. 1. ๋ํต๋ น๋ น ์ 12199ํธ๋ก ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 1์กฐ ์ 2ํญ(ํํ ์ 2์กฐ ์ 1ํญ ๋ณธ๋ฌธ ์ฐธ์กฐ), ์ 3ํญ(ํํ ์ 2์กฐ ์ 1ํญ ๋จ์ ์ฐธ์กฐ)/ [2] ๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น(1987. 7. 1. ๋ํต๋ น๋ น ์ 12199ํธ๋ก ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 1์กฐ ์ 2ํญ(ํํ ์ 2์กฐ ์ 1ํญ ๋ณธ๋ฌธ ์ฐธ์กฐ), ์ 3ํญ(ํํ ์ 2์กฐ ์ 1ํญ ๋จ์ ์ฐธ์กฐ)
ใ์ฐธ์กฐํ๋กใ
[1] ๋๋ฒ์ 1989. 8. 8. ์ ๊ณ 88ํ42 ํ๊ฒฐ(๊ณต1989, 1362), ๋๋ฒ์ 1991. 11. 12. ์ ๊ณ 90ํ2256 ํ๊ฒฐ(๊ณต1992, 118), ๋๋ฒ์ 1992. 3. 31. ์ ๊ณ 90ํ1260 ํ๊ฒฐ(๊ณต1992, 1427), ๋๋ฒ์ 1992. 3. 31. ์ ๊ณ 91ํ1533 ํ๊ฒฐ(๊ณต1992, 1433), ๋๋ฒ์ 1992. 5. 8. ์ ๊ณ 91ํ1656 ํ๊ฒฐ(๊ณต1992, 1856), ๋๋ฒ์ 1997. 3. 25. ์ ๊ณ 96ํ658 ํ๊ฒฐ(๊ณต1997์, 1235), ๋๋ฒ์ 1997. 3. 28. ์ ๊ณ 96ํ702 ํ๊ฒฐ
ใ์ ๋ฌธใ
ใ์๊ณ ,์๊ณ ์ธใ ๋ณด๋ ์ค๋ธ ๋ฆฌ์ ์ธ ์ค๋ธ ๋ ์ ๋๋ฒ์ํฐ ์ค๋ธ ์์ฑํด (์์ก๋๋ฆฌ์ธ ๋ณํธ์ฌ ์กฐํ์ฐ 9์ธ)
ใํผ๊ณ ,ํผ์๊ณ ์ธใ ํนํ์ฒญ์ฅ
ใ์์ฌํ๊ฒฐใ ํนํ๋ฒ์ 200 1. 6. 22. ์ ๊ณ 99ํ8653 ํ๊ฒฐ
ใ์ฃผ๋ฌธใ
์๊ณ ๋ฅผ ๊ธฐ๊ฐํ๋ค. ์๊ณ ๋น์ฉ์ ์๊ณ ์ ๋ถ๋ด์ผ๋ก ํ๋ค.
ใ์ด์ ใ
๊ตฌ ํนํ๋ฒ์ํ๋ น(1987. 7. 1. ๋ํต๋ น๋ น ์ 12199ํธ๋ก ๊ฐ์ ๋๊ธฐ ์ ์ ๊ฒ) ์ 1์กฐ ์ 2ํญ, ์ 3ํญ์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ด์ฉํ ๋ฐ๋ช
์ ๋ํ์ฌ ํนํ์ถ์์ ํ๊ณ ์ ํ๋ ์๋ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ธฐํํ๊ณ ๊ทธ ๊ธฐํ์ฌ์ค์ ์ฆ๋ช
ํ๋ ์๋ฉด์ ์ถ์์์ ์ฒจ๋ถํ์ฌ์ผ ํ๋ฉฐ, ๋ค๋ง ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ด ์ํ๋ ๊ธฐ์ ๋ถ์ผ์์ ํต์์ ์ง์์ ๊ฐ์ง ์(์ดํ '๋น์
์'๋ผ ํ๋ค)๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๋์๋ ๊ธฐํ์ ํ์ง ์๋ํ ์ ์๋ค๊ณ ๊ท์ ํ๊ณ ์๋๋ฐ, ์ด ๊ท์ ์ ์ทจ์ง๋ ๊ทน๋ฏธ์ ์ธ๊ณ์ ์กด์ฌํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ฑ์ง์ ๊ทธ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ํ์ค์ ์กด์ฌ๊ฐ ํ์ธ๋๊ณ ์ด๋ฅผ ์ฌ์ฐจ ์
์ํ ์ ์๋ค๋ ๋ณด์ฅ์ด ์๋ ํ ๊ทธ ๋ฐ๋ช
์ ์ฌํํ์ฌ ์ฐ์
์ ์ด์ฉํ ์ ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ด๋ผ ํ ๊ฒ์ด๊ณ , ๋ค๋ง ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ ์์ฑ๋ฌผ์ ๋น๋ก ๊ทธ ์์ฒด๊ฐ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์๋ํ๋๋ผ๋ ์ด๋ฅผ ์์ฑํ๋ ๊ณผ์ ์ ํ์ํ ์ถ๋ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ ๊ฒ์ด๊ณ , ๋ ๋ช
์ธ์์ ์ด๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ค๊ฐ ์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ๋ ๊ณผ์ ์ด ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ฌํํ ์ ์๋๋ก ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์๋ ๊ฒฝ์ฐ๋ผ๋ฉด ๊ทธ ์ต์ข
์์ฑ๋ฌผ์ด๋ ์ค๊ฐ ์์ฑ๋ฌผ ์์ฒด์ ๊ธฐํ์ ์๊ตฌํ ๊ฒ์ ์๋๋ผ ํ ๊ฒ์ด๋ค ( ๋๋ฒ์ 1997. 3. 25. ์ ๊ณ 96ํ658 ํ๊ฒฐ, 1997. 3. 28. ์ ๊ณ 96ํ702 ํ๊ฒฐ ๋ฑ ์ฐธ์กฐ).
๊ธฐ๋ก์ ์ํ๋ฉด, ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์๋ ๋ฒกํฐ pD11 ๋๋ pBD, ์์ฃผ์ธํฌ COS-7 ๋๋ BHK ๋ฑ์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ์ด์ฉ๋๊ณ ์๋๋ฐ, ์ด๋ ๊ฒ๋ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ตญ๋ด ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์์ผ๋ฏ๋ก, ๋น์
์๊ฐ ์ด๋ค ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์์ด ์ฆ๋ช
๋์ด์ผ ํ ๊ฒ์ด๋ค.
๋จผ์ ๋ฒกํฐ pD11์ pDHFR-III์ SV40 ์ค๋ฆฌ์ง ๋ฐ ์ด์ง์ธ์ ์์ด๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง๋ ๊ฒ์ธ๋ฐ, pDHFR-III๋ ๊ฐ ์ 9ํธ์ฆ์ ๊ทธ ์ ์กฐ๋ฐฉ๋ฒ์ด ๊ธฐ์ฌ๋์ด ์์ผ๋ pDHFR-III๋ฅผ ์ ์กฐํ๊ธฐ ์ํ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง๋ค์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์๋ค๋ ์ฆ๋ช
์ด ์์ผ๋ฉฐ(๋ฌธํ์ ๊ณต์ง๋ ์ฌ์ค๋ง์ผ๋ก ์ฉ์ด ์
์๊ฐ ์ฆ๋ช
๋๋ ๊ฒ์ด ์๋๋ค), ๊ฐ ์ 12ํธ์ฆ์ pBR322์ SV-40 DNA๊ฐ ์ฝ์
๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ดํ ATCC ์นดํ๋ก๊ทธ์ด์ง๋ง ์ด ๋ฏธ์๋ฌผ์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ ๋๊ตฌ์๊ฒ๋ ๋ถ์๋๋ ๊ฒ์ธ์ง ์ฌ๋ถ๋ ์ ์ ์์ด, ๋น์
์๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์์ pD11 ๋๋ ๊ทธ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง๋ค์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์๋ค๊ณ ์ธ์ ํ๊ธฐ ์ด๋ ต๋ค.
๋ํ, ๋ฒกํฐ pBD์ ๋ํ์ฌ ๋ณด๊ฑด๋, pBD8์ด ATCC์ ๊ธฐํ๋์ด ์์ผ๋ ๊ทธ ๊ธฐํ ์ฌ์ค๋ง์ผ๋ก๋ pBD8 ๋๋ pBD๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ๋๊ตฌ์๊ฒ๋ ๋ถ์๋๋ ๊ฒ์ธ์ง๋ฅผ ์ ์ ์๊ณ , ๊ฐ ์ 28ํธ์ฆ์ ์ง์ ์๋ pBD์ ์์ ๋ถ์์ ๋ณด์ฅํ๋ ๊ฒ์ ์๋์ด์ pBD์ ์ฉ์ด ์
์๋ ์ฆ๋ช
๋์ง ์๋ํ๊ณ , pBD๋ฅผ ์ ์กฐํ๊ธฐ ์ํ ์ถ๋ฐ๋ฌผ์ง ์ค DHFR, MT-I ๋ฐ SV-40 DNA๋ฅผ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ป์ ์ ์์๋ค๊ณ ๋ณผ ๋งํ ์ฆ๊ฑฐ๋ ์๋ค.
๋ฐ๋ผ์ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ฌ์ฉ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ค ๋ฒกํฐ pD11 ๋๋ pBD๊ฐ ํนํ์ฒญ์ฅ์ด ์ง์ ํ๋ ๊ตญ๋ด ๊ธฐํ๊ธฐ๊ด์ ๊ธฐํ๋์ด ์์ง ์๋ํ๊ณ ๋น์
์๊ฐ ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ์ถ์ ๋น์ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์
์ํ ์ ์์์ ์ฆ๋ช
ํ๋ ์๋ฃ๊ฐ ์๋ ์ด์, ๋ ๋์๊ฐ ์ดํ ๊ฒ๋ ์์ด ์ด ์ฌ๊ฑด ์ถ์๋ฐ๋ช
์ ๋น์
์๊ฐ ์ฉ์ดํ๊ฒ ์ฌํํ์ฌ ์ค์ํ ์ ์๋ ๋ฐ๋ช
์ ํด๋นํ์ฌ ๊ทธ ํนํ๋ฑ๋ก์ด ๊ฑฐ์ ๋์ด์ผ ํ ๊ฒ์ด์ด์, ๊ฐ์ ์ทจ์ง์ ์์ฌ ํ๋จ์ ์ ๋นํ๊ณ , ๊ฑฐ๊ธฐ์ ์๊ณ ์ด์ ๋ก ์ฃผ์ฅํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๊ธฐํ์ ๊ดํ ๋ฒ๋ฆฌ์คํด, ์ฌ๋ฆฌ๋ฏธ์ง, ํ๋จ์ ํ ๋ฑ์ ์๋ฒ์ด ์๋ค๊ณ ํ ์ ์๋ค.
๊ทธ๋ฌ๋ฏ๋ก ์๊ณ ๋ฅผ ๊ธฐ๊ฐํ๊ธฐ๋ก ํ์ฌ ๊ด์ฌ ๋ฒ๊ด์ ์ผ์น๋ ์๊ฒฌ์ผ๋ก ์ฃผ๋ฌธ๊ณผ ๊ฐ์ด ํ๊ฒฐํ๋ค.
๋๋ฒ๊ด ์ ์ง๋ด(์ฌํ์ฅ) ์กฐ๋ฌด์ ๊ฐ์ ์ฑ ์์ง์ด(์ฃผ์ฌ)
|
|
๋๊ธ 0๊ฐ
๋ก๊ทธ์ธ ํ์๋ฉด, ํ๋ก ๋๊ธ์ ๋ฑ๋กํ์ค ์ ์์ต๋๋ค.
๋ค์ด๋ฒ ๊ฒ์
๋ธ๋ก๊ทธ
์นดํ
๋ด์ค
์น์ฌ์ดํธ
|
|
[ ์ฐธ์กฐํ๋ก ์ฒด๊ณ๋ ]
-
[ ๋ฒ๊ด/๋๋ฒ๊ด ํ๊ทธ]
|